詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS6321299 |
商品介紹:
測定意義 土壤亞硝酸還原酶是反硝化作用中的關鍵酶之一,參與亞硝酸鹽至NO的還原反應,它的活性反映了生物降解過程中氮素的轉化效率,為氮素轉化規律的研究提供一定的依據。 測定原理 亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO,使樣品中參與重氮化反應生成紫紅色化合物的NO2—減少,即540nm處吸光值的變化可反應土壤中亞硝酸還原酶的活性。 需自備的儀器和用品 天平、、研缽、可見分光光度計、水浴鍋、低溫離心機、1mL玻璃比色皿。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
黑曲霉APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體Human LRCH1 ELISA Kit豬巨噬遷移抑制因子(糖基化抑制因子)(MIF)免疫試劑盒
*蟲擬蠟菌甲胎蛋白單克抗體(包被)Human LPXN ELISA Kit豬金屬硫蛋白(MT)免疫試劑盒
瓦克青霉甲胎蛋白單克抗體(檢測)Human LRAT ELISA Kit豬結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒
印度不動桿菌ADP核糖基化因子結合蛋白1抗體Human LIN7A ELISA Kit豬窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒
Bacillus 芳香烴受體抗體Human LMF2 ELISA Kit豬角化生長因子(KGF)免疫試劑盒
嗜鹽堿堿芽孢桿菌吸引抗體Human LIN28B ELISA Kit豬降鈣原(PCT)免疫試劑盒
球孢白僵菌腺苷三磷結合盒轉運體A1抗體Human LITAF ELISA Kit豬降鈣基因相關肽(CGRP)免疫試劑盒
柔嫩艾耳球蟲蛋白激B2Human LIN7B(Protein lin-7 homolog B) ELISA Kit豬堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒
平菇血管生成2抗體Human Liprin alpha 1 ELISA Kit豬甲狀腺(T4)免疫試劑盒
金針菇芳香化/色P450/雌激合成抗體Human LIV-1 ELISA Kit豬低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒
釀酒酵母腺苷A2A受體抗體Human LIN28B ELISA Kit豬激敏感性脂肪(HSL)免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌蛋白激A錨定蛋白95抗體Human LMBR1L ELISA Kit豬激動異構/分裂MB(CKMB)免疫試劑盒
曲霉頂膜鈉依賴性膽鹽轉運體蛋白抗體Human LMF2 ELISA Kit豬基質衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫試劑盒
*樺褐孔菌去整合樣金屬蛋白8抗體Human LIN7A ELISA Kit豬基質金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒
狀鞘單胞菌芳香乙酰脫乙酰基樣蛋白3抗體Human LIN7B(Protein lin-7 homolog B) ELISA Kit豬基質金屬蛋白9(MMP-9)免疫試劑盒
三孢布氏霉ACN9蛋白抗體Human LHPP ELISA Kit豬基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒
榛針孢酵母Nematospora│coryli 質量規格:>98%,BR 補體蛋白9試劑盒紫莖女貞苷A
阮繼生氏菌Ruania│sp. 質量規格:>99%,BR補體蛋白5試劑盒正丁
pr1.01739資源名稱: 皮氏羅爾斯通氏菌 質量規格:>98%,BC 補體蛋白4試劑盒梓
土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒50管/24樣膠孢 4-甲基-3(2H)-噠酮胰淀Elisa
球孢白僵 5-甲基-5-基-1,3-二惡烷-2-酮肝磷脂酰乙Elisa
亮白曲霉 12-溴-1-十二烷NADPH氧化2Elisa
蘇云金芽孢桿蘇云金亞種 2,2-二氟維生CElisa
類干酪乳桿 芐氧羰基-D-天冬 4-叔丁酯一水物肝核因子1βElisa
黃綠鏈霉 3-羥基-4-乙酮胰多肽Elisa
金龜子綠僵 4-羥基異喹啉氧化三Elisa
新城疫病 4-吡啶甲脒Caspase-1p20Elisa
變灰青霉 6-異硫酸熒光白介1βp17Elisa
鍺栓孔 4-氨甲基11β羥類固脫氫1型Elisa
紅曲霉 乙酸對叔丁基環己酯抗雙鏈DNA抗體;天然DNA抗體Elisa
細鏈格孢 磺酸酐酯Elisa
滑假絲酵母 1-環己基3氧代5α類固4脫氫2Elisa
谷棒桿 1H-吲唑-6-羧酸乙酯胰高血糖樣肽1.7-36Elisa
異常漢遜酵母 (3-甲酰基)乙酸乙酯胃促生長Elisa
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