詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321335 |
商品介紹:
測定意義 硅元素是一種十分重要的植物營養元素,土壤中有效硅含量影響著植物的光合作用、呼吸作用以及對逆境的抗性。 測定原理 硅酸根與鉬酸銨在弱酸條件下生成硅鉬酸,可被還原劑還原成硅鉬藍,在700nm有特征吸收峰。 自備實驗用品及儀器 天平、常溫離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、震蕩儀。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
枯草芽孢桿菌鋅指蛋白851抗體Human FGFBP2 ELISA Kit豚鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒
草分枝桿菌嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體Human FKBP10 ELISA Kit豚鼠脂(CHE)免疫試劑盒
線殼囊孢(座線孢)磷化c-fos抗體Human FKBP1A ELISA Kit豚鼠單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒
百脈根中間根瘤菌磷化c-fos抗體Human FKBP14 ELISA Kit豚鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
煙色齒耳磷化原癌基因c-Jun抗體Human FGFR1OP ELISA Kit豚鼠單氧化(MAO)免疫試劑盒
櫟金錢菌磷化原癌基因c-kit抗體Human FGFBP3 ELISA Kit豚鼠催產(OT)免疫試劑盒
反硝化鹽單胞菌1號染色體開放閱讀框148抗體Human FNDC3A ELISA Kit豚鼠促腎上腺皮質激(ACTH)免疫試劑盒
薄層菌屬性T抗原-4抗體Human FKBP1B ELISA Kit豚鼠促卵泡(FSH)免疫試劑盒
細鏈格孢鈣調調節蛋白相關蛋白抗體Human FN3KRP ELISA Kit豚鼠雌激(estrogen)免疫試劑盒
暗擬莖點霉(可訂購)緊密連接蛋白1抗體Human FNTA ELISA Kit豚鼠腸脂肪結合蛋白(iFABP)免疫試劑盒
產卟啉桿菌1號染色體開放閱讀框149抗體Human FNIP1(Folliculin-interacting protein 1) ELISA Kit豚鼠表皮生長因子(EGF)免疫試劑盒
產黑鏈霉菌磷化原癌基因c-kit抗體Human FLCN ELISA Kit豚鼠白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒
針葉樹散斑殼磷化原癌基因c-kit抗體Human FLJ25006 ELISA Kit豚鼠白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒
球孢白僵菌磷化淋巴衍生C-型凝集抗體Human FLJ10357 ELISA Kit豚鼠白介8(IL-8)免疫試劑盒
葡萄座腔菌2號染色體開放閱讀框39抗體Human FLI1 ELISA Kit豚鼠白介6(IL-6)免疫試劑盒
稻生黃單胞菌2號染色體開放閱讀框49抗體Human FMN1 ELISA Kit豚鼠白介5(IL-5)免疫試劑盒
根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格:>98%,BRα1微球蛋白/bikunin前體試劑盒5-羥基馬鞭草苷
沙漠奇異球菌Deinococcus│deserti 質量規格:>99%,BRα1性糖蛋白試劑盒去氧基醉椒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BRα1抗胰糜蛋白試劑盒去氫駱駝蓬堿
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鞘氨單胞 4-(溴甲基)苯酸白介23Elisa
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大豆慢生根瘤 聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-馬來酸)鈉鹽白介38Elisa
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