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技術(shù)文章

熒光定量PCR試劑選擇指南

點擊次數(shù)：3343 發(fā)布時間：2021-3-11

實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。市面上熒光定量試劑層出不窮，但是羅氏熒光定量試劑卻能永遠(yuǎn)脫穎而出，因為羅氏熒光定量試劑可幫你在實時定量PCR中獲得高擴增效率和高質(zhì)量熒光信號，還保證結(jié)果準(zhǔn)確度高。

FastStart Essential 系列

該系列是為不同儀器平臺優(yōu)化的無需ROX校正的高性能熒光定量PCR預(yù)混試劑，含兩類不同檢測方式的預(yù)混試劑，即染料法和探針法預(yù)混試劑。

1. FastStart聚合酶——從源頭上提升qPCR擴增檢測效果

FastStart qPCR預(yù)混液通過化學(xué)修飾法進行Taq DNA聚合酶的活性封閉及高溫啟動，無論是基于熒光染料法，還是水解探針法的檢測，都可在實時定量PCR中獲得高擴增效率和高質(zhì)量熒光信號，定量結(jié)果準(zhǔn)確度高。

2. 性能特點——高準(zhǔn)確度的基因研究結(jié)果源于以下幾點

獲取高熒光信號，使結(jié)果分析更為靈敏
使用化學(xué)修飾熱啟動的FastStart Taq DNA聚合酶，提升qPCR擴增效率
穩(wěn)定和可重復(fù)的結(jié)果，制備的反應(yīng)液可在室溫避光穩(wěn)定保存48 h再進行檢測
對于高GC含量或長至500bp片段進行擴增和檢測，無需額外試劑和優(yōu)化
含dUTP的預(yù)混液，防止殘留物污染導(dǎo)致的假陽性結(jié)果

FUMM(含ROX) 系列

當(dāng)然如果您的儀器需要進行ROX校正，才能得到準(zhǔn)確的熒光結(jié)果，羅氏也能提供另外一系列試劑：FUMM預(yù)混液（含ROX校正染料）。

1. 實用性廣——可在所有熒光定量PCR儀上使用

專門使用SYBR Green或者探針平臺進行兩步法qPCR而設(shè)計的即用型熱啟動反應(yīng)預(yù)混液，可幫您持續(xù)地獲得靈敏的、特異的和可重復(fù)的實驗結(jié)果，幫您的基因表達(dá)研究實驗提升信號品質(zhì)。

2. 設(shè)計*——非羅氏實時熒光PCR儀更適用

該系列是在羅氏的熱啟動PCR酶的基礎(chǔ)之上設(shè)計的，專門用于除了LightCycler系列儀器之外的所有其它實時定量PCR儀器平臺，尤其適用于需要使用ROX校正染料的儀器平臺。（注：雖然適用于所有熒光定量PCR儀，但更優(yōu)于應(yīng)用在非羅氏且需要ROX校正的平臺上）。

EvoScript一步法系列

上述兩種預(yù)混試劑都是兩步法熒光定量的，即實驗所用模板是DNA。另外我們還提供一步法所需預(yù)混試劑，即當(dāng)您的模板是RNA時，無需采用兩步法先進行逆轉(zhuǎn)錄實驗，再進行熒光定量實驗，采用EvoScript系列一次實驗即可完成您的熒光定量實驗。

1. 品質(zhì)——性能*，易于使用

采用單管包裝方便使用，使實驗快速完成同時有效避免加樣誤差；性能*，高靈敏度檢測，結(jié)果可重復(fù)性更好；一個酶完成反轉(zhuǎn)錄和熒光定量檢測實驗，更快速便捷獲得高特異性結(jié)果。

2. 應(yīng)用靈活——應(yīng)用范圍廣，防止污染

支持各種樣本來源的RNA，解決您的擔(dān)憂；支持UNG酶，有效避免交叉污染和在RT-qPCR過程中引起的假陽性和非特異性擴增等。

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